Coloration au calcofluor White

Il s'agit d'une méthode de coloration des polysaccharides. Le calcofluor White (Fluorescent Brightner 28) est capable de se lier par lien hydrogène aux polysaccharides β (1→ 4) et β (1→3). Il montre une affinité élevée pour la cellulose formant des liens hydrogènes avec les groupes hydroxyles libres. Il est aussi utilisé en médecine pour la mise en évidence de champignons dans des tissus car il se lie à la chitine. L'observation nécessite un microscope à fluorescence et une excitation UV.  Deux microphotographies de coupes paraffine colorées au calcofluor sont présentées ci dessous: une coupe dans une racine de Zea mays (en haut) et coupe dans un embryon d'Arabidopsis th. (en bas)

Voir le protocole pour coupes paraffine

Microphotographie d'une coupe paraffine transversale dans une extrémité de racine primaire de Zea mays. La coupe a été observée et photographiée avec un microscope à fluorescence Leica DMIRE 2 (filtre excitation 340-380 nm; émission 425 nm) équipé d'une caméra Leica DC300F. On observe une fluorescence des parois cellulaires riches en cellulose. A cette longueur d'onde d'excitation les parois riches en lignine ou subérine montrent une auto fluorescence.

Microphotographie d'une coupe paraffine dans un embryon d'Arabidopsis thaliana